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在运用ELISA试剂盒的进程,可将已知浓度的蛋白用血清或血浆调配到试剂盒标定的检测限的高值的2倍,参加50μl做两孔,一孔补入惯例的50μl规范品稀释液,ELISA试剂盒一孔补入50μl样本剖析缓冲液,即可区分出作用来,有时候,有些厂家为了到达“消除”的作用,在样本剖析缓冲液中参加待测方针蛋白,为了鉴别出这种状况,也可直接参加样本剖析缓冲液做一孔,一起做比照,这样可试出试剂盒中的针对血清血浆样本的缓冲液是否真的有用。
如该种类型ELISA试剂盒样本总量如为100μl的话,一般来说,会是50μl的样本加样量和50μl的特定的缓冲液。
1、如厂家没有供给专门用于血清血浆样本的缓冲液,那么只要用已知浓度的待测方针蛋白参加所测种属的血清作为样本加样和用已知浓度的待测方针蛋白参加PBS缓冲液中一起检测比照,ELISA试剂盒即可知道该试剂盒是否能够直接用来测血清血浆样本。
2、如厂家没有供给专门用于血清血浆样本的缓冲液,只是有一个抽象的或一致的稀释液,那么只要用已知浓度的待测方针蛋白参加所测种属的血清直接加样和用已知浓度的待测方针蛋白参加厂家供给的一致的缓冲液中一起检测,也可得出该试剂盒是否可直接用来检测血清血浆样本。
3、如厂家供给专门用于血清血浆样本的缓冲液,可用已知浓度的待测方针蛋白参加所测种属的血清直接加样和用缓冲液按说明书分别加样,也可得出成果。
现在ELISA试剂盒检测的样本中,除了细胞上清外,还有比较大的一部分是血清和血浆样本。关于ELISA试剂盒客户来说,在实验中可能用到不同的样本,怎么辨别所购的ELISA试剂盒能否测手中的样本呢?关于常见的细胞上清,咱们大家知道,培育细胞进程中,无特别状况一般是10%的牛血清参加培育基中,通过培育后,细胞的吸收耗费,之后细胞上清中蛋白含量会很少,并且关于一般牛血清出产的厂家来说,在出产进程中现已去除了,所以对一般ELISA而言,不会影响抗体抗原的结合。