影响ELISA试剂盒试验成果的要素

ELISA试剂盒，即酶联免疫法。ELISA法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，并具有操作简洁、无放射性危害的优点，因此多年来广泛应用于各高校、医院、血站和科研机构的试验室中。 

通过几年的试验调查，认为影响ELISA试验的要素有如下三方面：

一、试剂盒

1、抗原、抗体活性对效价的影响：主要是试剂中抗体（或抗原）的效价下降或失活，成果不易判别。再有ELISA试剂盒灵敏度高，对杂质的反响灵敏度也高，试验中空白对照OD值偏高或假阳性；

2、酶结合物浓度过高，也会导致OD值假性增高。

二、试验仪器

1、加样器是否通过校正，酶免测定血清用血量很少，如手工加样器的功能不好，吸取样品不，会使成果忽高忽低；

2、每次洗板前，应查看洗板机针孔有无阻塞。

三、ELISA试剂盒操作

1、检测前先将试剂盒从冰箱取出置室温平衡20min后运用，试剂用完及时放回冰箱冷藏，避免形成试验成果假性下降；

2、加样时留意勿触及包被板底部，避免擦伤包被物使抗体（抗原）掉落而影响试验成果的精确性；

3、洗刷不充分，会使成果假性增高，过分洗刷呈假阴性；

4、比色时应保持包被孔底部无异物、无水汽，特别是冬天板从37℃水浴箱取出时，底部留有水汽，应将板底擦干后进行比色，水汽或孔内气泡也会使OD值升高；

5、抗原与抗体反响达到完全平衡，依赖于温度与时刻。温度高于45℃易引起失活及符号物掉落，温度低于4℃，影响反响速度。

总归，由于ELISA试剂盒试验的影响要素较多，在实践工作中必须操作规范、仔细，避免和排除各种要素的影响，使之得到精确可靠的查验成果。