如何操作完美的ELISA实验

在做实验前首先需要了解该实验的杂乱性，虽然ELISA试剂盒操作简略，但过程多而杂乱，下面教您如何操作完美的ELISA实验？实验看似很无聊，其实在重要的洗刷过程中，如果未结合残留在微孔板中，那么它会添加布景噪音。如有必要，可添加洗刷液中的盐浓度，这会阻止非特异结合反应。如果布景过高，而您置疑洗刷不行时，可以测验添加洗刷次数。 

洗板方法有手艺与主动两种，在加样过程中留意：吸嘴的洁净与否和吸量的准确性，直接影响检测成果。因为吸嘴结构特别，导致清洗困难，加大了穿插污染的时机。主张用一次性吸嘴。加样器也要常常清洗，定期校准。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部，防止加在孔壁上部，并留意不可溅出。

ELISA试剂盒标准有96T与48T两种，我公司所提供的高质量进口试剂盒供试验室研讨使用，需要在2-8℃温度中保存，有效期为半年，也就是6个月。 

1. 浓洗刷液可能会有结晶分出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗刷时不影响成果。 

2. 严格按照说明书的操作进行，试验成果断定有必要以酶标仪读数为准。 

3. 所有样品，洗刷液和各种废弃物都应按感染物处理。 

ELISA试剂盒包被用抗原或抗体的浓度，包被的温度和时刻，包被液的pH等应根据试验的特点和资料的性质而选定。抗体和蛋白质抗原一般采用pH9.6的碳酸盐缓冲液作为稀释液，也有用pH7.2的磷酸盐缓冲液及pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀释液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后，在4-8℃冰箱中放置一个晚上，37℃中保温2小时被以为具有平等的包被效果。包被的最恰当浓度随载体和包被物的性质可有很大的改变，每批资料需经过试验与酶结合物的浓度协调选定。