植物组织样本的处理方法

植物样本是ELISA实验过程中最常见的样本之一，那么我们应该如何对植物样本进行处理呢？下面就来向大家介绍一下植物组织样本的处理方法。

一、匀浆介质

一般采用0.05mol/LTris-HCl,pH7.4磷酸盐缓冲液（PBS），可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度，目的是保持样本的等渗环境。

二、组织匀浆的制备

1、取组织块（0.2g～0.5g）最少可到5～10mg在冰冷的PBS中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。

2、按重量（g）：体积(ml)=1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下，用眼科小剪尽快剪碎组织块。

3、匀浆的方式：手工匀浆，机器匀浆。

手工匀浆：左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，制成20%的匀浆液。

机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000转/分上下研磨制成20%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10秒/次，间隙30秒，连续3～5次，在冰水中进行,可适当延长匀浆时间）。

镜检观察：取少量组织匀浆作涂片（直接涂片、染色均可以），显微镜下观察细胞是否破碎，若没有则可延长匀浆时间。

4、将制备好的20%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4000转/分左右，离心10～15分钟，取上清液进行测定。

三、样本保存

植物组织样本暂时不测定，可立即低温冻存，温度越低越好，中间如不反复冻融，-20℃以下可保存三个月，-70℃以下可保存六个月。制备好的匀浆液建议不要冻存，当天进行测定,如放置时间过长相关酶活会有所下降，部分指标4℃可存放3～5天（如SOD要存放2～3天，MDA可存放3～5，总蛋白测定可存5～7天。）

样本处理的好坏会直接影响实验结果的准确性，所以大家在处理样本时一定要严格按照要求进行处理，规范操作。