如何选择符合实验要求的ELISA试剂盒?
酶免官方商城 / 2021-09-16
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。ELISA试剂盒在选购时应注意以下几个方面:
1、明确研究种属:一般来说,厂家都会在产品名称上标明种属。
2、明确样本类型:不同厂家验证样本类型不同,即使同一厂家不同试剂盒,其验证样本类型也不尽相同。特别是复杂的血浆样本,因此购买前需仔细核对。
3、会预测自己的目标因子的浓度:一般来说,待测因子可以根据经验或资料获得参考的检测范围,且正常人与疾病状态存在差异。因而,必要时进行样本的稀释及选择合适检测范围的试剂盒极其重要。
4、检查试剂盒进行过哪些质控:质控数据在说明书中即可找到,在购买前检查试剂盒是否进行过严格的质控实验,包括批次内(Intra-Assay)及批次间(Inter-Assay)、掺入回收实验、线性稀释实验及交叉反应测试等,每个数据最好都看一下,确保超强的结果重现性及准确性。
5、需检测的因子数量:如果待测因子超过 5 个,且样本量较小时,单因子 ELISA 检测方法并不是好的选择。建议考虑多因子检测方法,可节约样本及时间成本,也可保证检测结果准确。