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一、ELISA试剂盒的概述:
1、灵敏度:有二层含义,为试剂检出被检物质的低量的能力;为试剂对大量样品中阳性检出的能力。
2、特异性:常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应,使测定结果升高,可能导致假阳性,所以交叉反应是评价其质量的关键指标。
3、简便性:指在不影响试剂的前三项指标的前题下,实验和测定步骤越少越好,在定性实验中结果判断简单明了,定量试验结果计算也应简单。
4、安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
5、经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,而市场价格比较合理。
6、试剂评价:需要有的确证方法和确证的样品进行检测。
二、ELISA试剂盒的技术流程:
1、ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性。
2、又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。
3、再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
4、加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
5、由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。
6、然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。
ELISA试剂盒的概述及技术流程今天就给大家分享到这了,看完本文您就应该有了基本的认识和了解相信大家都明白了吧!希望对大家有所帮助。